［文献解读］肺癌中MET基因D1228V突变与MET抑制剂获得性耐药相关
本帖最后由 抗癌小豆 于 2017-2-20 10:42 编辑Acquired MET D1228V mutation and resistance to MET inhibition in lung cancer
Cancer Discov December2016 IF: 19.783背景
[*]MET基因突变和扩增是EGFR抑制剂原发或获得性耐药的机制之一，TKI耐药的患者可能会从EGFR抑制剂联合MET抑制剂克唑替尼治疗中受益。
[*]MET基因的致癌突变是肺癌的一个亚型，同时MET基因也是非小细胞肺癌药物开发的候选原癌基因。
[*]MET抑制剂有两类，Ⅰ型抑制剂优先结合MET的活性构象，如克唑替尼；Ⅱ型抑制剂结合非活性构象，如卡博替尼，Ⅱ型抑制剂能够抑制更多的激酶靶点；各种MET抑制剂的有效性，使其应用于靶向治疗，但影响药物敏感和耐药的特定分子因素尚不明确.
摘要1例同时具有EGFR突变和MET扩增的肺腺癌患者，厄洛替尼治疗后进展，MET抑制剂savolitinib联合EGFR抑制剂osimertinib治疗后缓解显著。但仍发生了耐药，一个新的MET基因激酶区突变D1228V被检测发现。体外研究发现MET基因D1228V突变通过破坏药物结合诱导Ⅰ型MET抑制剂耐药，而对Ⅱ型MET抑制剂仍然具有敏感性。基于这些发现，患者继续接受了厄洛替尼联合Ⅱ型MET抑制剂卡博替尼治疗，得到了显著缓解.意义:
[*]多种结构不同的MET抑制剂正在开发用于非小细胞肺癌的治疗，明确这些药物的耐药机制是非常重要的。
[*]MET基因D1228V获得性突变介导Ⅰ型MET抑制剂耐药，而非Ⅱ型MET抑制剂，对MET抑制剂的临床应用具有一定的提示。
Case report患者信息：30岁，女性，无吸烟史，支气管镜活检诊断为肺腺癌，且具有EGFR基因19号外显子缺失；治疗史：1.阿法替尼，4周后扫描发现肺部肿块缓慢生长；2.同步放化疗，左颈部淋巴结肿大，活检显示复发性肺腺癌，影像学提示骨转移；3.厄洛替尼，疾病继续进展，NGS检测复发标本，确认具有EGFR基因19外显子缺失和高水平的MET扩增；4.入组Ⅰ期临床试验MET TKI savolitinib联合EGFRTKI osimertinib治疗，显著的临床缓解，4周后，颈部淋巴结几乎完全消失；36周后出现新的肺结节，确认疾病进展，肺结节手术切除，疾病进一步进展；NGS检测发现新发突变MET基因D1228V突变；5.EGFR TKI 厄洛替尼联合METTKI卡博替尼，4周后扫描显示显著缓解，治疗5个月仍然获益；
[*]NGS检测颈部淋巴结标本，确认具有EGFR基因19外显子缺失和高水平的MET扩增，MET扩增可能是其耐药的原因。
[*]入组Ⅰ期临床试验MET TKI savolitinib联合EGFRTKI osimertinib治疗，4周后，颈部淋巴结几乎完全消失。
[*]36周后出现新的肺结节，确认疾病进展，肺结节手术切除，疾病进一步进展；
[*]NGS检测手术标本发现新发突变MET基因D1228V突变，可能与药物耐药相关。
Savolitinib联合Osimertinib治疗过程中血浆cfDNA基因突变情况
[*]在治疗初血浆中含有高水平EGFR 基因 exon19 del，治疗开始后快速下降，12周后检测不到，36周（疾病进展时）再次检测到EGFR 基因 exon19 del；
[*]血浆中MET基因D1228V突变在疾病进展时与EGFR 基因 exon19 del同时出现；
[*]血浆中MET和EGFR 基因突变水平随着疾病的进一步进展持续升高；
EGFRTKI 厄洛替尼联合MET TKI卡博替尼治疗，疾病症状迅速改善，4周后显著缓解，治疗5个月继续获益
蛋白模型预测Ⅰ型和Ⅱ型MET抑制剂在药物结合中的差
[*]Savolitinib为Ⅰ型MET抑制剂，结合MET激酶的活性构象；依赖与MET活化环上的Tyr1230形成的π-π相互作用(A)；
[*]METAsp1228和 Lys1110 残基是维持活化环所必须的，通过静电相互作用促进与Savolitinib的结合；
[*]METD1228V突变打断了连接Asp1228和 Lys1110 的盐桥，导致活化环重新定位，并丧失了MET与Savolitinib之间的π-π相互作用(B).
[*]卡博替尼为Ⅱ型MET抑制剂，结合MET激酶的非活性构象；不依赖Tyr1230的作用 (C)；
[*]MET D1228V突变不影响与药物的结合(D)；
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接楼上［文献解读］肺癌中MET基因D1228V突变与MET抑制剂获得性耐药相关
体外研究证实MET D1228V导致Ⅰ型MET抑制剂耐药
在293T细胞中表达野生型MET或D1228V突变型MET
[*]Ⅰ型和Ⅱ型MET抑制剂能够抑制野生型MET自磷酸化；
[*]Ⅰ型MET抑制剂savolitinib,克唑替尼和 INC280对D1228V突变型MET无效，均不能抑制突变型MET磷酸化；
[*]Ⅱ型MET抑制剂卡博替尼, MGCD265和 merestinib能够有效的抑制突变型MET磷酸化
在Ba/F3细胞中表达野生型TPR-MET或D1228V突变型TPR-MET融合蛋白
[*]TPR-METWTBa/F3细胞对savolitinib或卡博替尼高度敏感；
[*]TPR-METD1228V Ba/F3细胞对savolitinib没有反应，但是对卡博替尼仍保持敏感性；
在EGFR突变且EGFR TKI敏感的PC9细胞中表达野生型TPR-MET或D1228V突变型TPR-MET融合蛋白
[*]TPR-METWT PC9细胞对吉非替尼联合savolitinib或卡博替尼均敏感；
[*]TPR-METD1228V PC9细胞仅对吉非替尼联合卡博替尼敏感；
EGFR和MET信号通路分析
[*]在TPR-METWT PC9细胞中，吉非替尼联合savolitinib或卡博替尼能够完全抑制EGFR和MET的磷酸化及MAPK/ERK信号；
[*]在TPR-METD1228V PC9细胞中，吉非替尼联合savolitinib不能抑制MET磷酸化，导致持续的MAPK/ERK信号，但吉非替尼联合卡博替尼仍然保持敏感，能够抑制EGFR和MET的磷酸化及下游的MAPK/ERK信号；
讨论
[*]MET激酶区突变导致Ⅰ型MET抑制剂耐药，而非Ⅱ型MET抑制剂，提示这两类药物在肺癌的应用中；
[*]研究也显示D1228N可导致克唑替尼获得性耐药，MET基因D1228高度保守，可能是一个热点突变，其耐药机制可能会成为一个反复出现的临床问题。
[*]MET抑制剂用于晚期非小细胞肺癌治疗正在积极开发，在提高药物活性的同时，耐药机制的研究有助于获得更多的治疗选择。潜在的价值，对Ⅰ型MET抑制剂耐药的患者可能对Ⅱ型MET抑制剂有效。
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本帖最后由 中微子MWXX 于 2017-3-13 10:09 编辑
感谢楼主分享，祝福好运！ 谢谢分享！
谢谢，学习了！请问，我的免疫组化显示cmet强＋＞75％'
而基因检测报告Met没有突变，
只有21外显子敏感丰度22.8％.
而我服用特罗凯12个月了，缓慢耐药了。下一步怎么办？困惑，迷茫？求指点
wisdom 发表于 2017-2-21 18:45
谢谢，学习了！请问，我的免疫组化显示cmet强＋＞75％'
而基因检测报告Met没有突变，
只有21外显子敏感丰度 ...
请问免疫组化、基因检测（MET和21外显子）是什么时候做的呢？是在特罗凯用药之前还是耐药之后？
免疫组化是反映c-MET是否有过表达，基因检测是反映c-MET基因是否有扩增、突变。两者之间不是完全对等的关系。而哪个与用药有关，主要取决于是否激活了c-MET信号通路。
根据吴一龙教授在2016年ASCO上的一篇报道，研究纳入了32名MET高表达（EGFR、ALK、KRAS和ROS1基因都是阴性）并使用克唑替尼的NSCLC（非小细胞肺癌）患者，其中25人可进行疗效评估。相关的数据如下：
1）25人中：c-MET高表达25人，16人达到PR（部分缓解，64%）、1人达到SD（疾病稳定，4%）、8人PD（疾病进展，32%）
2）25人中，FISH阳性即基因扩增13人，10人达到PR（77%）。
研究结论认为：综合免疫组化的结果和基因检测的结果可以更好地预测克唑替尼的药物敏感性。
报道详情http://meetinglibrary.asco.org/content/169179-176
从数据中也可以看出，基因结果指导克唑替尼使用更有效。临床医生也是把免疫组化作为初筛，免疫组化过表达的再做基因检测，如果基因检测确认阳性才建议用克唑替尼。
下一步的治疗方案，还是要结合目前的基因突变情况来看的。又回到了最开始问的问题，免疫组化、基因检测（MET和21外显子）是什么时候做的呢？是在特罗凯用药之前还是耐药之后？ 抗癌小豆 发表于 2017-2-20 10:54
接楼上［文献解读］肺癌中MET基因D1228V突变与MET抑制剂获得性耐药相关
体外研究证实MET D1228V导致Ⅰ型ME ...
楼主辛苦，谢谢分享。 谢谢楼主的翻译，辛苦了 感谢分享！ 感谢分享！